Gramova škvrna: ako sa vyrába a na čo slúži

Obsah

• Ako sa robí Gramovo farbenie
• Načo to je

Gramovo zafarbenie, alebo jednoducho Gram, je rýchla a jednoduchá technika, ktorej cieľom je odlíšiť baktérie podľa charakteristík ich bunkovej steny po vystavení rôznym farbivám a roztokom.

Pomocou Gramovho farbenia je teda možné okrem tvaru baktérií skontrolovať aj ich farbu, ktorú získavajú, a tento výsledok je dôležitý pre definovanie ďalších stratégií identifikácie bakteriálnych druhov a pre indikáciu preventívnej liečby lekárom. podľa mikroskopicky pozorovaných charakteristík.

Gramovo farbenie sa zvyčajne vykonáva rutinne v laboratóriu a je súčasťou skúšky bakterioskopiou. Pochopte, čo je bakterioskopia a ako sa robí.

Ako sa robí Gramovo farbenie

Gramovo zafarbenie je rýchla, praktická a lacná metóda na identifikáciu baktérií zodpovedných za infekcie, ktorá je pre lekárov užitočná pri indikácii preventívnej liečby možných infekcií, pretože sú známe špecifické vlastnosti týchto skupín baktérií,

Gramovo farbenie sa robí v 7 hlavných krokoch, protokol sa však môže líšiť v závislosti od laboratória:

1. Na podložné sklíčko sa umiestni niekoľko kolónií baktérie a pridá sa kvapka vody, aby sa uľahčila homogenizácia kolónií;
2. Nechajte trochu zaschnúť a čepeľ môže rýchlo prechádzať plameňom, aby sa podporilo sušenie, je však potrebné dávať pozor na teplotu, pretože ak je teplota príliš vysoká, je možné, že dôjde k zmene štruktúry zariadenia. baktérie, ktoré môžu interferovať s výsledkom skúšky;
3. Keď je sklíčko suché, zakryte fialovým kryštálovým farbivom a nechajte pôsobiť asi 1 minútu;
4. Sklíčko umyte prúdom tečúcej vody a sklíčko zakryte lugolom, ktorý má za cieľ zafixovať modré farbivo, a nechajte pôsobiť 1 minútu. Oba typy baktérií môžu absorbovať komplex tvorený farbivom a lugolom a zmodrieť;
5. Potom sklíčko umyte pod tečúcou vodou a naneste 95% alkoholu a nechajte ho pôsobiť 30 sekúnd. Alkohol je zodpovedný za rozpustenie lipidovej membrány, ktorá vytvára gramnegatívne baktérie, a tým za odstránenie komplexu vytvoreného medzi farbivom a lugolom a odfarbením týchto baktérií. V prípade grampozitívnych baktérií však alkohol dehydratuje bunkovú stenu grampozitívnych baktérií, čo spôsobí stiahnutie pórov a ich nepriepustnosť;
6. Potom opäť umyte v tečúcej vode a sklíčko zakryte druhým farbivom, fuchsínom alebo safranínom a nechajte pôsobiť 30 sekúnd;
7. Potom sklíčko umyte pod tečúcou vodou a nechajte vyschnúť pri izbovej teplote.

Len čo je sklíčko suché, je možné dať kvapku ponorného oleja a pozorovať sklíčko pod mikroskopom so 100-násobným objektívom, pričom je možné skontrolovať prítomnosť alebo neprítomnosť baktérií, ako aj prítomnosť kvasiniek a epitelu. bunky.

Načo to je

Gramové farbenie má hlavný cieľ diferencovať baktérie podľa charakteristík bunkovej steny a všeobecnej morfológie. Podľa charakteristík pozorovaných pod mikroskopom teda možno baktérie klasifikovať na:

• Grampozitívne baktérie, ktoré sú zviditeľnené modrou farbou kvôli tomu, že nie sú sfarbené alkoholom, pretože majú hrubšiu bunkovú stenu a ich póry sa pri pôsobení lugolu zúžia;
• Gramnegatívne baktérie, ktoré sú vizualizované ružovou / fialovou farbou kvôli tomu, že majú sfarbenie alkoholom a sú zafarbené safranínom alebo fuchsínom.

Po pozorovaní baktérií pod mikroskopom je možné, že sa v laboratóriu uskutočnia ďalšie testy na identifikáciu druhov baktérií. Avšak prostredníctvom Grama a asociácie so znakmi a prejavmi, ktoré osoba predstavuje, môže lekár indikovať preventívnu liečbu, kým nie sú k dispozícii výsledky konkrétnejších vyšetrení, pretože je tak možné znížiť rýchlosť bakteriálnej replikácie a zabrániť komplikáciám.